液体クロマトグラフィーサンプルの前処理の方法と要件

液体クロマトグラフィー分析では、サンプルの前処理は、分析データの精度と信頼性を確保するための主要なステップです。サンプルからサンプルの収集から最終注入までの一連の前処理ステップをカバーし、サンプルから不純物を除去し、サンプル特性を調整し、ターゲット分析物を濃縮し、液体クロマトグラフィーシステムを潜在的な損傷から保護することを目指しています。正しいサンプル前処理方法は、分析の感度を改善するだけでなく、クロマトグラムの明確性と解像度を大幅に改善します。

1。液体クロマトグラフィーの前処理方法サンプル1。サンプル精製：（1）固相抽出（SPE）：固体吸着剤を使用して、サンプルに標的化合物を選択的に吸着させ、適切な溶媒で排出して分離と精製の目的を達成します。 （2）液液抽出（LLE）：2つの不混和性溶媒のサンプルの異なる成分のパーティション係数の差に基づいて、ターゲット化合物をある溶媒から別の溶媒に移します。 （3）超臨界流体抽出（SFE）：抽出剤として超臨界流体（超臨界二酸化炭素など）を使用して、圧力と温度を調整してサンプル内の標的化合物を抽出することにより、溶解能力を制御します。 2。サンプル濃度：（1）サンプル内の標的化合物の濃度が低い場合、検出感度を改善するために濃度が必要です。一般的に使用される方法には、回転蒸発、凍結乾燥、窒素吹き濃度などが含まれます。3。サンプル誘導体化：（1）直接検出が容易ではない特定の化合物の場合、検出性の高いグループ（蛍光群など）を導入して、検出の感度と選択性を改善することができます。 4.サンプル希釈：（1）サンプル濃度が高すぎる場合、液体クロマトグラフの検出範囲を超えるか、機器が損傷します。現時点では、適切な希釈が必要です。 5.サンプルpH調整：（1）一部の液体クロマトグラフィーカラムには、サンプルのpH値に厳密な要件があるため、サンプルのpH値を酸またはアルカリを追加して、カラムを保護し、分離効果を最適化することで調整する必要があります。 6.サンプルろ過：（1）注入前に、通常、適切なフィルター（微孔フィルター膜など）を使用して、サンプルの粒子状物質と懸濁液を除去して、カラムをブロックしたり、分析結果に影響を与えないようにする必要があります。 7.サンプル安定性処理：（1）分解、酸化または揮発性の揮発性のサンプルの場合、適切な測定（冷蔵、光の回避、安定剤の追加など）は、安定性を維持するために必要です。 8。自動化前処理システム：（1）技術の開発により、ますます多くの研究所が自動化された前処理システムを使用して、運用プロセスを簡素化し、処理効率を改善し、人間のエラーを減らし始めました。これらのシステムは通常、複数の前処理手順を統合し、液体クロマトグラフに直接接続できる自動噴射機能を備えています。

2。液体クロマトグラフィーサンプル前処理要件1。サンプル調製（1）表現：撮影したサンプルが代表的であり、全体的なサンプルの特性を真に反映できることを確認してください。 （2）安定性：分解しやすい、酸化または揮発性のあるサンプルの場合、安定性を維持するために適切な対策を講じる必要があります（冷蔵、光の回避、安定剤の追加など）。 2。精製と分離（1）メソッド選択：サンプルの特性と分析要件に従って、固相抽出（SPE）、液液抽出（LLE）などの適切な精製と分離方法を選択します。SPE：固体吸着剤を使用してサンプルの標的化合物の選択吸着を溶解し、適切な溶媒を溶出します。 LLE：抽出は、2つの不混和性溶媒のサンプル内の異なる成分のパーティション係数の差に基づいています。 （2）条件制御：精製と分離中の温度、pH値、溶媒タイプ、および投与量を厳密に制御し、標的化合物の効果的な抽出と分離を確保します。 3。濃度と希釈（1）濃度：濃度が低いサンプル、回転蒸発、凍結乾燥、窒素吹き濃度、およびその他の方法を使用して、検出感度を改善します。 （2）希釈：サンプル濃度が高すぎる場合、液体クロマトグラフの検出範囲を超えたり、機器を損傷するのを避けるために適切な希釈が必要です。 4。誘導体化（1）必要性：直接検出するのが容易ではない特定の化合物（UV吸収や蛍光のない成分など）については、検出の感度と選択性を改善するために誘導体化が実行されます。 （2）反応条件：誘導体化反応の条件（温度、時間、pHなど）の条件を厳密に制御して、完全かつ選択的反応を確保します。 5。ろ過と脱ガス（1）ろ過：適切なフィルター（微小孔フィルター膜など）を使用して、サンプルから粒子状物質と懸濁液を除去して、カラムをブロックしたり、分析結果に影響を与えないようにします。フィルター膜は、0.15μmを超える粒子を保持できるはずです。 （2）脱ガス：ガス（酸素、二酸化炭素など）の脱ガスをサンプルに溶解して、クロマトグラフィーカラムに泡が形成され、分離効果に影響を与えないようにします。 6。機器と試薬（1）機器の洗浄：汚染と損傷を防ぐために、液体クロマトグラフとそのアクセサリを清潔で乾燥させてください。 （2）試薬の純度：分析結果の精度を確保するために、クロマトグラフィー的に純粋な、高品位の純粋または分析的純粋な試薬を使用します。不純物を含む試薬の使用を避けて、測定結果に影響を与えるその他のピークを避けてください。 7.操作仕様（1）規則に従ってください。操作手順に厳密に従って、サンプルの前処理と分析操作を実行して、ヒューマンエラーを減らします。 （2）記録の詳細：サンプルの前処理プロセスの各ステップとその後の分析と問題のトレーサビリティの条件を記録します。 8。環境制御（1）清潔に保つ：計器室は他の研究所から分離され、清潔に保つ必要があります。 （2）温度と湿度の制御：エアコンを計装室に設置し、空気の相対湿度（一般的に70％未満）の湿気、腐食防止、衝撃防止、制御に注意を払って、機器の通常の動作を確保し、サービス寿命を延長する必要があります。

液体クロマトグラフィーのサンプル前処理は、実験者が強固な理論的基盤と豊富な実務経験を持つ必要がある複雑で素晴らしいプロセスです。適切な前処理方法を選択し、運用要件と予防策に厳密に従うことにより、サンプルの干渉を効果的に除去し、ターゲット分析物を濃縮し、分析の感度と精度を向上させることができます。同時に、合理的なサンプル前処理は、液体クロマトグラフィーシステムを汚染と損傷から保護し、そのサービス寿命を延ばすこともできます。