首页 / 新闻 / Opentrons Flex的自动化NGS建库流程如何加载QIAseq®试剂盒协议 Opentrons Flex的自动化NGS建库流程如何加载QIAseq®试剂盒协议
在生命科学研究领域，下一代测序（NGS）技术已成为探索基因组奥秘的强大工具。而 NGS 文库制备作为测序流程的关键起始环节，其质量和效率直接影响后续结果的准确性与可靠性。Opentrons Flex 自动化平台的出现，为简化 NGS 文库制备流程带来了曙光。通过加载 QIAseq 试剂盒协议，科研人员能够实现高通量、精准且重复性高的文库制备，极大提升实验效率。本文将详细介绍如何在 Opentrons Flex 上加载 QIAseq 试剂盒协议，助力科研工作者顺利开展实验。
移液工作站
前期准备：开启自动化之旅
- 设备与软件检查
在开始加载协议前，确保 Opentrons Flex 设备处于正常运行状态。检查硬件部分，如移液器的吸头安装是否稳固，机械臂移动是否顺畅，各模块（如温控模块、磁模块等）有无故障提示。同时，确认设备软件已更新至最新版本，以保障与 QIAseq 试剂盒协议的兼容性。软件更新通常可在 Opentrons 官方网站下载对应安装包，通过设备连接电脑进行更新操作，按照提示步骤逐步完成，更新完成后重启设备。
- 试剂与耗材准备
准备好所需的 QIAseq 试剂盒，仔细检查试剂盒内各试剂的完整性与有效期，避免因试剂问题影响实验结果。试剂盒一般包含用于 DNA 片段化、末端修复、接头连接、PCR 扩增等关键步骤的多种试剂。同时，根据实验规模准备足量符合 Opentrons Flex 设备规格的耗材，如 96 孔板、深孔板、吸头盒等。耗材应选择高质量产品，确保移液过程中无液体残留或泄漏，且不与试剂发生化学反应干扰实验。例如，选用经过严格质量检测的无菌、无核酸酶吸头，防止样本污染。
- 实验台面布局规划
合理的台面布局能提高实验效率与准确性。依据 QIAseq 试剂盒协议步骤和 Opentrons Flex 设备操作流程，规划试剂板、样本板、耗材及各功能模块在实验台面上的摆放位置。通常，将频繁使用的试剂和耗材放置在靠近移液器操作范围的区域，便于快速取用；温控模块、磁模块等根据实验步骤顺序依次摆放，确保样本在不同处理阶段能高效流转。比如，将装有起始样本的 96 孔板放置在移液器易于吸取的位置，而用于磁珠纯化步骤的磁模块则放置在靠近后续洗脱操作区域，减少机械臂移动距离与时间。
协议加载：搭建实验桥梁
- 进入 Opentrons 协议库
打开 Opentrons 设备配套软件，在软件界面中找到并点击进入 “协议库” 选项。Opentrons 协议库汇聚了众多经过验证的实验协议，涵盖多种应用场景，其中就包括针对 QIAseq 试剂盒的自动化 NGS 建库协议。若您是首次使用该软件，可能需要登录账号，账号注册可通过 Opentrons 官网按照指引完成，注册成功后登录即可畅享协议库资源。
- 搜索 QIAseq 试剂盒协议
在协议库搜索栏中，输入 “QIAseq” 相关关键词，如 “QIAseq fx DNA library kit”（若使用该具体试剂盒）。搜索结果将呈现一系列与 QIAseq 试剂盒相关的协议，此时需仔细筛选。优先选择由 Opentrons 官方团队或 QIAgen（试剂盒生产厂家）验证过的协议，这类协议在实验准确性与稳定性上更有保障。协议详情页面会展示协议的适用试剂盒版本、样本类型、实验步骤概述以及验证结果等关键信息，认真阅读以确定其是否符合您的实验需求。
- 下载并导入协议
找到合适的 QIAseq 试剂盒协议后，点击 “下载” 按钮。下载完成的协议文件通常保存在软件默认下载路径中。随后，在 Opentrons 软件中找到 “导入协议” 功能，选择刚才下载的协议文件进行导入。导入过程可能需要等待片刻，待软件完成协议解析与加载，此时协议便成功进入您的设备操作列表，准备就绪可进行后续实验设置。
实验设置：定制专属流程
- 协议参数调整
在 Opentrons 软件中打开已加载的 QIAseq 试剂盒协议，根据实际实验需求调整相关参数。常见可调整参数包括样本数量、起始样本浓度、各反应步骤的温度与时间设置等。例如，若您本次实验仅处理 48 个样本，需将协议中的样本数量参数从默认的 96 调整为 48；若起始样本浓度与协议预设不同，需重新输入准确浓度值，以便软件精准计算后续试剂添加量。参数调整务必谨慎，确保符合实验原理与试剂盒说明书要求，避免因错误设置导致实验失败。
- 样本与试剂信息录入
在软件界面中，按照提示依次录入样本信息，如样本名称、样本来源、所属实验批次等。这些信息将与实验数据关联，方便后续结果分析与追溯。同时，准确录入试剂盒内各试剂的相关信息，如试剂批号、开封日期等，有助于实验质量控制与问题排查。录入完成后，仔细核对信息准确性，防止因录入错误引发实验偏差。
- 模拟运行检查
在正式运行实验前，利用 Opentrons 软件的模拟运行功能对加载的协议进行检查。模拟运行过程中，软件将按照协议步骤虚拟展示移液器的移液路径、机械臂的移动轨迹以及各模块的工作状态。通过观察模拟运行情况，可提前发现潜在问题，如移液器吸头与孔板碰撞风险、试剂添加顺序错误等。若发现问题，及时返回协议编辑界面进行修正，再次模拟运行直至无误，为实际实验运行筑牢基础。
在 Opentrons Flex 上加载 QIAseq 试剂盒协议并进行合理设置，是实现高效、精准自动化 NGS 建库的关键。从前期细致的准备工作，到协议加载与实验设置的每一个环节，都需要科研人员严谨对待。遵循上述步骤，您将顺利开启自动化 NGS 建库之旅，为深入的基因组研究提供有力支持，在生命科学探索之路上迈出坚实步伐。
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