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サーマルサイクラーPCR(ポリメラーゼ連鎖反応)は、特定のDNAフラグメントを増幅するための重要な実験装置です。これにより、複数の温度サイクルで変性、アニーリング、拡張ステップを繰り返すことにより、DNAの迅速な複製と増幅が可能になります。この記事では、サーマルサイクラーの組成と作業原理を詳細に紹介します。
1。サーマルサイクラーの組成構造
サーマルサイクラーPCRの組成構造には、主に次の部分が含まれています。
1。制御システム
制御システムは、マイクロプロセッサと温度サイクルのさまざまなパラメーターを設定および調整するための一連のソフトウェアを含むサーマルサイクラーのコア部分です。制御システムを通じて、研究者は変性、アニーリング、および拡張の温度と時間を正確に設定し、それによりPCR反応の効率的な進行を確保できます。
2。温度モジュール
温度モジュールは、温度制御を達成する上で重要なコンポーネントです。通常、複数の独立した加熱と冷却ユニットで構成されており、それぞれが温度を独立して調整できます。温度モジュールの高精度と迅速な応答能力は、PCR反応の精度を確保するための鍵です。
3。サンプルタンク
サンプルタンクは、PCR反応チューブを配置するための部位です。最新のサーマルサイクラーは通常、複数のサンプルを同時に処理できるマルチウェルプレートデザインを使用して、実験効率を向上させることができます。サンプルタンクの材料は通常、サンプル温度の均一性と安定性を確保するための良好な熱伝導率を持っています。
4。ディスプレイおよび操作インターフェイス
ディスプレイおよび操作インターフェイスは、現在の温度、時間、サイクルステータスを表示するために使用され、ユーザーがパラメーターを入力および変更できるようにします。ほとんどのサーマルサイクラーには、タッチスクリーンまたはボタンインターフェイスが装備されているため、操作が容易で直感的になります。
2。組成構造の作業原則
1。トランスジェンダーフェーズ
変性段階では、サンプルの二本鎖DNAが高温(通常は94〜98°C)で溶けて、一本鎖DNAを形成します。このステップでは、DNAが完全に溶けているが劣化しないことを確認するために、正確な温度制御が必要です。
2。アニーリング段階
アニーリング相は温度を約50〜65°Cに低下させ、プライマーがターゲットのDNA配列に結合できるようにします。この段階での温度設定は、温度が高すぎるとプライマーが効果的に結合できなくなり、温度が低すぎると非特異的な結合につながる可能性があるため、重要です。
3。拡張段階
拡張フェーズ中、温度は72°Cに上昇し、DNAポリメラーゼはプライマーの3インチ端から伸び始め、新しいDNA鎖を合成します。このステップの温度と時間は、DNAポリメラーゼの最適な活性と反応速度を確保するために正確な制御を必要とします。
4.繰り返しサイクル
上記の3つの段階は完全なPCRサイクルを形成し、通常は20〜40の繰り返しが必要です。サーマルサイクラー制御システムは、このプロセスを自動的に実行して、各サイクルの温度と時間が正確であることを確認します。
3.サーマルサイクラーPCRの利点
Thermal Cycler PCRには、現代の分子生物学研究に多くの利点があります。
1。効率
サーマルサイクラーは、短時間で大量のDNAを増幅し、実験の効率と収量を大幅に改善できます。
2。精度
温度と時間を正確に制御することにより、サーマルサイクラーはPCR反応の高い特異性と感度を確保し、非特異的製品の生成を減らします。
3。再現性
最新のサーマルサイクラーには、通常、高い自動化と標準化の特性があり、実験結果の優れた再現性と一貫性を可能にします。
4。結論
Thermal Cycler PCRは、正確な組成と正確な作業原理を通じて、迅速かつ正確なDNA増幅を達成します。その効率、精度、再現性により、分子生物学の研究と医学的診断において重要な位置になります。テクノロジーの継続的な進歩により、サーマルサイクラーPCRのアプリケーション範囲はますます広範になり、科学的研究と医療の健康により便利さとブレークスルーをもたらします。
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